Антиадгезивную активность изучали на культуре клеток кожно-мышечных фибробластов эмбриона человека.

Тест-культуры микроорганизмов: клинические штаммы микроорганизмов, выделенные из ротовой полости волонтеров: Staphylococcus aureus, Streptococcus salivarius, Streptococcus sangius, Streptococcus sobrinius.

К культуре клеток добавляли образец пасты в разведении 1:20000 (в присутствии 50% сыворотки человека) и культуру тест-штамма в дозе 10⁸КОЕ/мл, инкубировали при 37℃. После инкубации клетки монослоя отмывали от неприкрепившихся бактерий многократной сменой среды Игла, фиксировали этиловым спиртом, окрашивали по Романовскому-Гимза и исследовали микроскопически.

Степень адгезии микроба определяли по показателю микробной нагрузки относительно контроля, принимаемого за 100%.

Исследование проводилось слепым методом. Все исследования проводили в 3-х повторениях.

После 3 мин. инкубации, что соответствует продолжительности обычной чиски зубов, подавление адгезии составило:

• S.aureus - 80%
• Str.salivarius - 80%
• Str.sangius - 83%
• Str.sobrinius - 79%

При увеличении времени экспозиции до 2 часов антиадгезивная эффективность значительно снижалась, что, по-видимому, связано с обратимостью адгезии в короткие сроки после внесения штаммов в модельную систему, так как обычно через 1-2 часа адгезия становится необратимой.

Рис. 1. Контроль клеток фибробластов

Рис. 2. Клетки + Str.salivarius

Рис. 3. Клетки + Str.salivarius + паста с бромелаином
(экспозиция 2 ч.)

Рис. 4. Клетки + Str.salivarius + паста с бромелаином
(экспозиция 3 мин.)

В течение двух месяцев были обследованы 40 пациентов обоего пола в возрасте 18-36 лет с хроническим катаральным гингивитом. По случайному признаку пациенты были распределены на 2 группы:

1. Пациенты 1-й группы применяли зубную пасту R.O.C.S. с запатентованным комплексом MINERALIN (глицерофосфат кальция + хлорид магния + ксилит + потеолитический фермент бромелаин).
2. Пациенты 2-й – пасту Enzycal, содержащую ферменты амилоксидазу, глюкозоксидазу, амилогликозидазу и фторид натрия 1450 ppm.

Внутри каждой из них были выделены 2 подгруппы в зависимости от используемой зубной щетки:

1. стандартная зубная щетка средней жесткости
2. мягкая щетка Curаprox

Исследования зубных паст проводилось двойным слепым методом. Повторные осмотры, включающие оценку индексов и диагностические пробы, проводились через 1 и 2 недели, далее через 1 и 2 месяца.

После первичного визуального осмотра и подсчета индексов было установлено, что в обеих группах преобладают острый и хронический катаральный гингивит легкой степени.

Уже на 14-й день исследования показатели РМА у пациентов 1-й группы снизились с 29,5% до 2% и 1,5% в подгруппах “A” и “B” соответственно. Во 2-й группе значения индекса уменьшились до 3% и 2% (рис. 4). Лучшие результаты в подгруппах “B” были обусловлены применением мягкой зубной щетки.

У всех обследуемых исчезла кровоточивость, что также указывало на достижение противовоспалительного эффекта в тканях пародонта (рис. 3).

Рис. 1. Уровень гигиены полости рта

Рис. 2. Количество налета в придесневой области

Рис. 3. Индекс кровоточивости

Рис. 4. Оценка степени тяжести гингивита

Исследование действия ферментосодержащих зубных паст при начальных формах воспалительных заболеваний пародонта, для которых характерна повышенная склонность к образованию зубного налета, подтвердило их высокую эффективность.

При регулярной чистке зубов этими пастами с использованием мягкой щетки уже через неделю наблюдалось выраженное противовоспалительное действие на пародонт.

После применения зубной пасты R.O.C.S. в течение 2-х недель наблюдалось более значительное улучшение гигиенического состояния полости рта и выраженный противовоспалительный эффект по данным оценки индексов гигиены и РМА.

При контрольном осмотре через два месяца ухудшения результатов в обеих группах не отмечалось.

В течение всего времени применения паст не было зарегистрировано ни одного случая местнораздражающего и аллергического действия на слизистую оболочку полости рта.

Под наблюдением в течение одного месяца находились 30 пациентов в возрасте от 12 до 36 месяцев с кариесом раннего детского возраста (18 мальчиков и 12 девочек). Слепым методом было произведено разделение пациентов на две равные группы:

1. Пациенты 1-й группы для проведения местной противомикробной и реминерализующей терапии в течение одного месяца использовали гель R.O.C.S. Medical Minerals.
2. Пациентам 2-й группы для проведения местной противомикробной терапии были назначены ежедневные одно-двухминутные аппликации 0,1% раствора хлоргексидина один раз в день в течение 7-10 дней. В качестве реминерализующей терапии в течение одного месяца ежедневно применялся гель «Белагель Са/P».

Аппликации реминерализующих гелей было рекомендовано проводить после чистки зубов 4-5 раз в день. Все процедуры проводили родители пациентов в домашних условиях после предварительного инструктирования.

Исходно и в конце назначенного лечебного курса всем пациентам провели молекулярно-биологические исследования с применением мультиплексной ПЦР на базе лаборатории НИМСИ.

В 1-й группе было выявлено достоверное снижение колонизации кариесогенными видами, показано положительное влияние компонентов реминерализующего геля R.O.C.S. Medical Minerals на соотношение кариесогенных и резидентных видов, а также снижение количества и частоты выделения некоторых представителей пародонтопатогенных видов анаэробных бактерий (таб.1). Важной положительной характеристикой изменения состава микробиоценоза биопленки зуба в первой группе также является исчезновение грибов рода Candida.

Исследовании микробной флоры зубной бляшки у пациентов 2-й группы через месяц после лечения показало лишь некоторые позитивные сдвиги в соотношении кариесогенной и нормальной флоры, снижение частоты выделения некоторых вирулентных штамов. В то же время снижалось количество и частота выделения представителей резидентной группы бактерий – энтерококков. Кроме того частота выявления дрожжеподобных грибов Candida albicans увеличилась, при этом наблюдалось достоверное увеличение обсемененности зубной бляшки грибами. Эти данные свидетельствуют о развитии дисбиоза при использовании хлоргексидина.

Таблица 1. Сравнительная оценка изменения частоты выделения микробной флоры зубной бляшки в двух группах после курса терапии

Клиническое обследование через месяц показало отсутствие прироста новых кариозных полостей и очагов деминерализации у пациентов 1-й группы; на имеющихся меловидных пятнах происходило восстановление блеска; приостановилось развитие кариозных дефектов; исчезли признаки катарального гингивита.

При клиническом обследовании пациентов 2-й группы также не было зафиксировано прироста новых кариозных полостей; исчезновение признаков катарального гингивита наблюдалось у 80% пациентов (от числа имевших его исходно)

Включение как ксилита, так и хлоргексидина в качестве противомикробной терапии в комплексную схему лечения кариеса у детей раннего возраста приводит к снижению частоты выделения и уровня обсемененности кариесогенной и пародонтопатогенной флорой зубной бляшки.

Представленные данные свидетельствуют о более физиологичном действии ксилита, он оказывает положительное влияние на состав микробиоценоза биопленки зуба, нормализуя качественный (видовой) состав и количественную обсемененность бактериями кариесогенных и стабилизирующих резидентных видов.