Антиадгезивную активность изучали на культуре клеток кожно-мышечных фибробластов эмбриона человека.

Тест-культуры микроорганизмов: клинические штаммы микроорганизмов, выделенные из ротовой полости волонтеров: Staphylococcus aureus, Streptococcus salivarius, Streptococcus sangius, Streptococcus sobrinius.

К культуре клеток добавляли образец пасты в разведении 1:20000 (в присутствии 50% сыворотки человека) и культуру тест-штамма в дозе 10⁸КОЕ/мл, инкубировали при 37℃. После инкубации клетки монослоя отмывали от неприкрепившихся бактерий многократной сменой среды Игла, фиксировали этиловым спиртом, окрашивали по Романовскому-Гимза и исследовали микроскопически.

Степень адгезии микроба определяли по показателю микробной нагрузки относительно контроля, принимаемого за 100%.

Исследование проводилось слепым методом. Все исследования проводили в 3-х повторениях.

После 3 мин. инкубации, что соответствует продолжительности обычной чиски зубов, подавление адгезии составило:

• S.aureus - 80%
• Str.salivarius - 80%
• Str.sangius - 83%
• Str.sobrinius - 79%

При увеличении времени экспозиции до 2 часов антиадгезивная эффективность значительно снижалась, что, по-видимому, связано с обратимостью адгезии в короткие сроки после внесения штаммов в модельную систему, так как обычно через 1-2 часа адгезия становится необратимой.

Рис. 1. Контроль клеток фибробластов

Рис. 2. Клетки + Str.salivarius

Рис. 3. Клетки + Str.salivarius + паста с бромелаином
(экспозиция 2 ч.)

Рис. 4. Клетки + Str.salivarius + паста с бромелаином
(экспозиция 3 мин.)

Под наблюдением в течение одного месяца находились 30 пациентов в возрасте от 12 до 36 месяцев с кариесом раннего детского возраста (18 мальчиков и 12 девочек). Слепым методом было произведено разделение пациентов на две равные группы:

1. Пациенты 1-й группы для проведения местной противомикробной и реминерализующей терапии в течение одного месяца использовали гель R.O.C.S. Medical Minerals.
2. Пациентам 2-й группы для проведения местной противомикробной терапии были назначены ежедневные одно-двухминутные аппликации 0,1% раствора хлоргексидина один раз в день в течение 7-10 дней. В качестве реминерализующей терапии в течение одного месяца ежедневно применялся гель «Белагель Са/P».

Аппликации реминерализующих гелей было рекомендовано проводить после чистки зубов 4-5 раз в день. Все процедуры проводили родители пациентов в домашних условиях после предварительного инструктирования.

Исходно и в конце назначенного лечебного курса всем пациентам провели молекулярно-биологические исследования с применением мультиплексной ПЦР на базе лаборатории НИМСИ.

В 1-й группе было выявлено достоверное снижение колонизации кариесогенными видами, показано положительное влияние компонентов реминерализующего геля R.O.C.S. Medical Minerals на соотношение кариесогенных и резидентных видов, а также снижение количества и частоты выделения некоторых представителей пародонтопатогенных видов анаэробных бактерий (таб.1). Важной положительной характеристикой изменения состава микробиоценоза биопленки зуба в первой группе также является исчезновение грибов рода Candida.

Исследовании микробной флоры зубной бляшки у пациентов 2-й группы через месяц после лечения показало лишь некоторые позитивные сдвиги в соотношении кариесогенной и нормальной флоры, снижение частоты выделения некоторых вирулентных штамов. В то же время снижалось количество и частота выделения представителей резидентной группы бактерий – энтерококков. Кроме того частота выявления дрожжеподобных грибов Candida albicans увеличилась, при этом наблюдалось достоверное увеличение обсемененности зубной бляшки грибами. Эти данные свидетельствуют о развитии дисбиоза при использовании хлоргексидина.

Таблица 1. Сравнительная оценка изменения частоты выделения микробной флоры зубной бляшки в двух группах после курса терапии

Клиническое обследование через месяц показало отсутствие прироста новых кариозных полостей и очагов деминерализации у пациентов 1-й группы; на имеющихся меловидных пятнах происходило восстановление блеска; приостановилось развитие кариозных дефектов; исчезли признаки катарального гингивита.

При клиническом обследовании пациентов 2-й группы также не было зафиксировано прироста новых кариозных полостей; исчезновение признаков катарального гингивита наблюдалось у 80% пациентов (от числа имевших его исходно)

Включение как ксилита, так и хлоргексидина в качестве противомикробной терапии в комплексную схему лечения кариеса у детей раннего возраста приводит к снижению частоты выделения и уровня обсемененности кариесогенной и пародонтопатогенной флорой зубной бляшки.

Представленные данные свидетельствуют о более физиологичном действии ксилита, он оказывает положительное влияние на состав микробиоценоза биопленки зуба, нормализуя качественный (видовой) состав и количественную обсемененность бактериями кариесогенных и стабилизирующих резидентных видов.

На образцах удаленных человеческих зубов, разрезанных продольно на три-четыре части, при помощи специального раствора были созданы искусственные подповерхностные окна деминерализации (2 мм х 3 мм). Затем образцы были рандомно разделены на 4 группы.

Каждый образец эмали обрабатывали в течение 3 мин при 25 °C дважды в день в течение последовательных 14 дней суспензией зубной пасты на основе силики:

1. без F^- и ксилита (база),
2. с 500 ppm F^- (NaF),
3. с 500 ppm F^- (NaF) и 5% ксилита,
4. коммерчески доступной зубной пастой с 500 ppm F^- (NaF).

После этого образцы промывали и помещали в реминерализующий раствор при 37 °C.

Изменения средней потери флуоресценции F, размера окна деминерализации и величины Δ Q в 3-й группе были значительнее по сравнению с другими группами (Р < 0,05).

исходно

3-й день

7-й день

14-й день

Полученные результаты свидетельствуют о том, что включение ксилита в зубную пасту с фтором может быть полезным для усиления реминерализации in vivo.

Для участия в этом двойном слепом клиническом исследовании кариеса были отобраны 3 394 школьника в возрасте 7-12 лет из 28 государственных школ центрального плато Коста-Рики. Дети, принятые к участию, были разделены на две сбалансированные по возрасту и полу группы:

• Дети 1-й группы для ежедневной гигиены использовали тестируемое средство для чистки зубов на основе дигидрата дикальцийфосфата, содержащее 0,836% монофторфосфата натрия (1100 ppm F) и 10% ксилита;
• Во 2-й группе – средство для чистки зубов с положительным контролем, содержащее 0,836% монофторфосфата натрия (1100 ppm F) на основе дигидрата дикальцийфосфата.

Исследование проводилось в соответствии с рекомендациями по клиническим исследованиям кариеса, опубликованными в 1988 году Советом по стоматологической терапии Американской стоматологической ассоциации, и использовало клинические диагностические критерии, изложенные в руководствах 1991 года, опубликованных Национальным институтом стоматологических исследований (NIH/NIDR). Рентгенограммы зубов не использовались.

Для оценки прироста кариеса рассчитывали изменение индексов КПп (сумма кариозных и пломбированных поверхностей) и КПз (сумма пломбированных и кариозных зубов).

Таблица 1. Прирост кариеса за 30-месячный период исследования

Как для КПп, так и для КПз прирост, связанный с тестируемым средством, содержащим 10% ксилита, был статистически значимо ниже, чем при использовании средства для чистки зубов без ксилита (Р < 0,05).

Под наблюдением в течение одного месяца находились 30 пациентов в возрасте от 12 до 36 месяцев с кариесом раннего детского возраста (18 мальчиков и 12 девочек). Слепым методом было произведено разделение пациентов на две равные группы:

1. Пациенты 1-й группы для проведения местной противомикробной и реминерализующей терапии в течение одного месяца использовали гель R.O.C.S. Medical Minerals.
2. Пациентам 2-й группы для проведения местной противомикробной терапии были назначены ежедневные одно-двухминутные аппликации 0,1% раствора хлоргексидина один раз в день в течение 7-10 дней. В качестве реминерализующей терапии в течение одного месяца ежедневно применялся гель «Белагель Са/P».

Аппликации реминерализующих гелей было рекомендовано проводить после чистки зубов 4-5 раз в день. Все процедуры проводили родители пациентов в домашних условиях после предварительного инструктирования.

Исходно и в конце назначенного лечебного курса всем пациентам провели молекулярно-биологические исследования с применением мультиплексной ПЦР на базе лаборатории НИМСИ.

В 1-й группе было выявлено достоверное снижение колонизации кариесогенными видами, показано положительное влияние компонентов реминерализующего геля R.O.C.S. Medical Minerals на соотношение кариесогенных и резидентных видов, а также снижение количества и частоты выделения некоторых представителей пародонтопатогенных видов анаэробных бактерий (таб.1). Важной положительной характеристикой изменения состава микробиоценоза биопленки зуба в первой группе также является исчезновение грибов рода Candida.

Исследовании микробной флоры зубной бляшки у пациентов 2-й группы через месяц после лечения показало лишь некоторые позитивные сдвиги в соотношении кариесогенной и нормальной флоры, снижение частоты выделения некоторых вирулентных штамов. В то же время снижалось количество и частота выделения представителей резидентной группы бактерий – энтерококков. Кроме того частота выявления дрожжеподобных грибов Candida albicans увеличилась, при этом наблюдалось достоверное увеличение обсемененности зубной бляшки грибами. Эти данные свидетельствуют о развитии дисбиоза при использовании хлоргексидина.

Таблица 1. Сравнительная оценка изменения частоты выделения микробной флоры зубной бляшки в двух группах после курса терапии

Клиническое обследование через месяц показало отсутствие прироста новых кариозных полостей и очагов деминерализации у пациентов 1-й группы; на имеющихся меловидных пятнах происходило восстановление блеска; приостановилось развитие кариозных дефектов; исчезли признаки катарального гингивита.

При клиническом обследовании пациентов 2-й группы также не было зафиксировано прироста новых кариозных полостей; исчезновение признаков катарального гингивита наблюдалось у 80% пациентов (от числа имевших его исходно)

Включение как ксилита, так и хлоргексидина в качестве противомикробной терапии в комплексную схему лечения кариеса у детей раннего возраста приводит к снижению частоты выделения и уровня обсемененности кариесогенной и пародонтопатогенной флорой зубной бляшки.

Представленные данные свидетельствуют о более физиологичном действии ксилита, он оказывает положительное влияние на состав микробиоценоза биопленки зуба, нормализуя качественный (видовой) состав и количественную обсемененность бактериями кариесогенных и стабилизирующих резидентных видов.